免疫血清的制備是常用的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)
更新時(shí)間：2020-12-03 點(diǎn)擊次數(shù)：2055次
免疫血清的制備是常用的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。高效價(jià)、高特異性的免疫血清可作為免疫學(xué)診斷的試劑(如用于制備免疫標(biāo)記抗體等)，也可供特異性免疫治療用。
免疫血清的效價(jià)高低取決于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的免疫反應(yīng)性及抗原的免疫原性。如以免疫原性強(qiáng)的抗原刺激高應(yīng)答性的機(jī)體，常可獲得高效價(jià)的免疫血清。
而使用免疫原性弱的抗原免疫時(shí)，則需同時(shí)加用佐劑以增強(qiáng)抗原的免疫原性。免疫血清的特異性主要取決于免疫用抗原的純度。
因此，如欲獲得高特異性的免疫血清，必須予先純化抗原。此外，抗原的劑量、免疫途徑及注射抗原的時(shí)間間隔等，也是影響免疫血清效價(jià)的重要因素應(yīng)予重視。
原理
具有免疫原性的抗原可刺激機(jī)體相應(yīng)B細(xì)胞增殖、分化形成漿細(xì)胞并分泌特異性抗體。由于抗原分子表面的不同決定簇為不同特異性的B細(xì)胞克隆所識(shí)別，因此由某一抗原刺激機(jī)體后產(chǎn)生的抗體，實(shí)際上為針對(duì)該抗原分子表面不同決定簇的抗體混合物(即多克隆抗體)。
另外，抗體的產(chǎn)生具有回憶應(yīng)答的規(guī)律性，牨m現(xiàn)為初次免疫注射與再次免疫注射后的抗體應(yīng)答特點(diǎn)截然不同。是由于記憶性B細(xì)胞參與再次應(yīng)答所致。
免疫用的抗原必須經(jīng)FCA或FIA充分乳化后才能注射，否則將明顯影響抗原的免疫效果。上述制備乳化抗原的方法較費(fèi)時(shí)、費(fèi)力。采用H-81微型振蕩混合器法或三腔管研磨法制備。
前者是將抗原液與佐劑按比例混合后，置于混合器上使之劇烈振蕩(頻率2900轉(zhuǎn)/分，振幅6mm);后者是將免疫用的佐劑和抗原液按比例混合后，吸入注射器內(nèi)再將注射器連接于三腔管上反復(fù)抽吸研磨。這兩種方法約1小時(shí)即可使抗原充分乳化。
會(huì)員_a.png)