Percoll和淋巴細(xì)胞分離液(淋分)都是利用細(xì)胞密度不同來分離細(xì)胞的，但是percoll區(qū)分的密度梯度更多，就是如果幾種細(xì)胞密度相差不多時(shí)，percoll依然能分開，可是普通的淋分就無能為力了，也可以認(rèn)為，percoll分離的細(xì)胞純度更高，
Ficoll與Percoll均為密度梯度離心法
①Ficoll-Hypaque密度梯度離心法：人外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，其體積、形狀和比重與其他細(xì)胞不同，紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞比重較大，為1.092左右，而淋巴細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞比重為1.075左右。利用密度在1.077±0.001g/L之間近于等滲的Ficoll-Hypaque混合溶液(稱為淋巴細(xì)胞分層液)作密度梯度離心時(shí),各種血液成分將按密度梯度重新分布聚集。血漿和血小板由于密度較低,故懸浮于分層液的上部;紅細(xì)胞與粒細(xì)胞由于密度較大,故沉于分層液的底部;PBMC密度稍低于分層液,故位于分層液界面上,這樣就可獲得PBMC。
②Percoll密度梯度離心法：Percoll是Pharmacia公司的商品名，成分為硅化聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，為無毒，無刺激的新型密度梯度離心分離劑。聚乙烯吡咯酮包被的硅膠混懸液，它具有易成等滲、粘度低、無毒性、不引起細(xì)胞聚集等優(yōu)點(diǎn)，已得到廣泛引用。由于Percoll在培養(yǎng)基中顆粒大小不等，其在離心過程中自然形成密度梯度，從而將不同密度的細(xì)胞分離出來。將1份10×PBS與9份percoll儲存液混合，制成等滲Percoll懸液，此懸液被認(rèn)為是100 % Percoll懸液，其密度為1.1294g/ml,可通過用PBS(1x)或組織培養(yǎng)液稀釋此99.99%Percoll而獲得適宜密度進(jìn)行細(xì)胞分離，因?yàn)橄♂尪扰c密度線性相關(guān)
一句話總結(jié):Ficoll只能分離出密度在1.077±0.001g/L之間的淋巴細(xì)胞,PERCOLL能將全血中的多種細(xì)胞分離出來,若只分離淋巴細(xì)胞,可以用普通淋巴細(xì)胞分離液
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