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          福爾根DNA染色液
          更新時間:2016-05-12   點擊次數(shù):2957次

          福爾根DNA染色液

          產(chǎn)品簡介:

          脫氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基綠-派洛寧法、吖啶橙熒光法等,其中zui經(jīng)典的是Feulgen,該法是一種經(jīng)典的酶組織化學(xué)法。

          NobleRyder Feulgen Stain 原理在于DNA經(jīng)溫和的弱酸(例如鹽酸)水解后,嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開,并且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開,在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。醛基在原位與 Schiff試劑結(jié)合,形成紫紅色化合物,使細胞內(nèi)含有DNA的部位呈紫紅色。紫紅色的產(chǎn)生是因為反應(yīng)產(chǎn)物的分子內(nèi)有醌基(醌基是一個具有顏色的發(fā)色團,所以凡含有DNA的部位就呈紫紅色。該水解作用不影響核糖-嘌呤結(jié)合鍵,因此RNA用此法處理后則分解,所以該法不適用于證明RNA

          產(chǎn)品組成

          編號

          名稱

          D6610

          3×50ml

          Storage

          試劑(A):Schiff Reagent

          50ml

          4℃ 避光

          試劑(B):

          SO2

          B1:弱酸溶液

          50ml

          RT

          B2:亞硫酸鹽溶液

          50ml

          RT

          使用說明書

          1

               

          自備材料:

          1、蒸餾水、

          2、恒溫箱

           

          操作步驟(僅供參考)

          ()石蠟切片染色:

          1、組織固定:Carnoy固定石蠟切片較好,10%福爾馬林亦可,不宜采用Bouin固定液。

          2、配制弱酸工作液:按弱酸溶液:蒸餾水=1:4配制,即取1份弱酸溶液、4份蒸餾水,充分混合,即獲得弱酸工作液。

          3、石蠟切片脫蠟至蒸餾水。

          4、入弱酸工作液,室溫浸洗一下。

          5、切片入預(yù)熱至60℃的弱酸工作液,孵育8min。

          6、切片入室溫的弱酸工作液中沖洗1min。

          7、蒸餾水沖洗。

          8、切片入Schiff Reagent,室溫避光染色30~60min。

          9、在上述染色過程中,配制SO2水工作液。按弱酸溶液:亞硫酸鹽溶液:蒸餾水=1:5:94 配制,即取弱酸溶液1份、亞硫酸鹽溶液5份、蒸餾水94份,充分混合,即配即用。

          10、用新鮮配制的SO2水工作液洗切片3次,每次90s。

          11、蒸餾水中洗凈。經(jīng)系列乙醇脫水。二甲苯透明并封片。

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